Церковь в Риме является старейшей из действующих русских церквей в Италии. 6 октября 1803 года император Александр I утвердил предложение Коллегии иностранных дел о её создании при российской миссии, аккредитованной при Папском престоле. Из упраздненной Захарьевской церкви в Петербурге и не отправленной в Турин посольской церкви 1788 года были взяты необходимые богослужебные предметы из серебра, подсвечники и Евангелие в дорогом окладе. Иконостас был изготовлен специально. Также был назначен священник, молодой отец Василий Иоаннович Иванов.

Несмотря на распоряжение императора Александра I о строительстве православного храма в Риме в 1803 году, его возведение завершилось только в 1828 году благодаря усилиям князя Григория Гагарина. Константин Тон спроектировал домовую церковь при миссии. Впоследствии храм несколько раз менял своё местоположение. Лишь в 1932 году в особняке Марии Чернышевой была освящена новая церковь по проекту архитектора князя Владимира Волконского.

Церковь разместили на первом этаже, и со стороны двора к ней пристроили алтарную часть. Храм был украшен золотой мозаикой и зеленым мрамором. В церкви находился одноярусный иконостас работы Константина Тона. Здесь хранились иконы, созданные Петром Басиным, Карлом Брюлловым, Федором Бруни, а также переданная с Афона Иверская икона Божией Матери, афонский образ Божией Матери «Вратарницы» и другие.