История храма начинается в 1700 году, когда жители Григорий Кошкин, Захар Елисеев и Яков Аникеев переселились из прихода Успенской церкви, где началось кораблестроение, в Акатовское предместье. В октябре того же года они обратились к Императору Петру I, находившемуся в Воронеже, с просьбой разрешить вырубку леса для строительства новой церкви, которую они хотели посвятить Успению Божией Матери. Храм вскоре был возведен и освящен Святителем Митрофаном, первым епископом Воронежским. Вероятно, Святитель посчитал неудобным наличие в городе церквей с одинаковым названием, и новый храм получил имя Введенский.

В 1780 году деревянная церковь была заменена каменной, с двумя престолами. Помимо главного, в храме был устроен придел в честь мученика Иоанна Воина, а в XIX веке добавился еще один придел, посвященный святителям Митрофану Воронежскому и Тихону Задонскому. Храм издавна считался одним из самых красивых в городе, его архитектура несет черты школы знаменитого зодчего XVIII века Б. Растрелли.

К началу XX века приход Введенской церкви насчитывал 77 дворов. С 1887 года при храме действовало попечительство о малоимущих прихожанах, а с 1891 года, первая в епархии приходская школа с «рукодельными классами». В этом храме был крещен известный русский писатель Иван Бунин.

На небольшом кладбище при церкви покоятся служившие здесь священники и благочестивые миряне, преимущественно купеческого сословия. Имена некоторых из них сохранились в летописном «Синодике», но сами могилы были уничтожены в печально известные годы.

В середине 30-х годов Введенский храм был закрыт. На протяжении нескольких десятилетий его здание использовалось различными организациями и постепенно разрушалось.

В 1999 году Введенская церковь была возвращена епархии. «Мы приобрели этот храм как дар Божий», отметил правящий архиерей Воронежско-Липецкой епархии, владыка Мефодий (Немцов). 4 декабря 1999 года, в престольный праздник, восстановленный храм был освящен правящим архиереем, и в нем была совершена Божественная литургия впервые после долгих лет запустения. С тех пор каждое воскресенье и в двунадесятые праздники здесь проходят ранние Литургии, а в течение всей недели совершаются требы: крещение, венчание, отпевание. Храм украшается трудами сестер обители и местных иконописцев. Иконы многоярусного иконостаса, резные тябла и киоты выполнены по древним образцам.

В феврале 2002 года на колокольню были подняты колокола, отлитые на пожертвования прихожан. На самом большом из них мастер запечатлел имена благотворителей. Теперь, как и столетие назад, над Введенской улицей с ее старинными домиками и садами разносится благовест, призывая в храм Божий на молитву.