Le monastère est situé au centre de l'ancienne ville de Péréiaslav, au nord de la citadelle. Entre 1695 et 1700, la cathédrale en pierre de l'Ascension du Seigneur a été construite ici, financée par le hetman Ivan Mazepa. Autour de la cathédrale, des bâtiments en bois ont été érigés, formant ensemble un ensemble architectural du nouveau monastère masculin. En 1700, après la restauration du siège épiscopal existant à l'époque de la Rus' de Kiev, le monastère de l'Ascension est devenu la résidence de l'archevêque en fonction, ce qui a contribué à la formation d'un nouveau centre urbain. Jusqu'en 1733 et depuis 1785, l'évêque de Péréiaslav servait de vicaire auprès du Métropolite de Kiev, et entre ces dates, il était archevêque d'un diocèse autonome, qui comprenait non seulement la région de Péréiaslav, mais aussi la population orthodoxe de l'Ukraine de la rive droite, restée sous le pouvoir de la Pologne catholique jusqu'à la fin du XVIIIe siècle. Entre 1785 et 1793, la ville de Sloutsk est devenue temporairement le centre du diocèse, en 1799, il a été renommé diocèse de Malorussie-Péréiaslav, en 1803, diocèse de Poltava-Péréiaslav, et en 1847, le siège a été transféré à Poltava. Jusqu'au début du XXe siècle, Péréiaslav faisait partie de la région de Poltava. En 1816, le personnel du monastère a été transféré à Saratov, après quoi le monastère de l'Ascension a été considéré comme hors cadre, et en 1847, il a été rattaché à la Maison archiépiscopale de Poltava.

En 1701, Mazepa a offert au monastère l'Évangile de Pérèsopnitsa, devant lequel prêtent serment les Présidents de l'Ukraine. Ce livre manuscrit, connu pour sa décoration artistique, contient la première traduction connue de l'Évangile canonique en ukrainien. L'Évangile a été créé en Volhynie : une partie du manuscrit a été réalisée en 1556 dans le monastère féminin de Dvorets près d'Iziaslav, l'autre, en 1561 dans le monastère masculin de Pérèsopnitsa en région de Rivne. Le travail sur le livre a été financé par la princesse Anastasia Zaslavska-Olchanska, qui a pris le nom de moniale de Parascève. Dans les années 1830, le philologue Iosif Bodiansky a découvert le livre dans la bibliothèque du séminaire de Péréiaslav, à partir des publications duquel a commencé l'étude scientifique de l'Évangile de Pérèsopnitsa comme un monument exceptionnel de la littérature spirituelle ukrainienne. Après le transfert du séminaire à Poltava, le livre a quitté Péréiaslav et a ensuite été conservé au musée historique et régional de Poltava, puis après la guerre, au musée-réserve de la Laure des Grottes de Kiev, d'où il a été transféré à la Bibliothèque nationale d'Ukraine nommée d'après Volodymyr Vernadski.

Depuis 1738, un Collège a fonctionné au monastère, l'une des écoles supérieures de l'Ukraine du XVIIIe siècle, ouverte par l'évêque de Péréiaslav Arseni Berlo. L'enseignement au Collège était accessible à toutes les classes sociales, commençant à 11 ans et durant 11-12 ans. Environ la moitié des élèves venaient de familles défavorisées et vivaient dans le dortoir financé par le diocèse. Dans les classes inférieures, on étudiait le slavon d'église, le latin et le grec, le catéchisme, les bases de la foi chrétienne, l'arithmétique et la géographie. Dans les classes intermédiaires, on enseignait la poétique et la rhétorique, et dans les classes supérieures, la philosophie et la théologie. Entre 1753 et 1754, le philosophe ukrainien Hryhoriy Skovoroda a enseigné la poétique au Collège. En 1776, le Collège a été transformé en séminaire spirituel, qui a été transféré à Poltava en 1862. Au départ, le Collège était situé dans une maison en bois, qui a brûlé en 1748, après quoi les cours ont été transférés dans une maison privée vacante. Entre 1753 et 1757, un bâtiment en pierre du Collège a été construit, qui existe encore aujourd'hui. Depuis 1862, une école spirituelle s'y est installée, et en 1972, le Musée mémorial de Hryhoriy Skovoroda a été ouvert.

Le 4 octobre 1766, la tête du saint martyr Daniel Kouchnyr, le staroste de l'église de l'Assomption de la localité de Mliiv, exécuté pour avoir restitué l'église à l'orthodoxie, a été enterrée dans la cathédrale de l'Ascension. Le culte de sa mémoire a commencé immédiatement après sa mort, et en 1994, le Saint Synode de l'Église orthodoxe ukrainienne l'a canonisé, établissant la célébration le 11 août. Depuis 1786, les reliques du saint martyr Makariy d'Ovroutsk et de Kaniv, tué par les Turcs en 1678, se trouvaient dans la cathédrale. En 1942, les reliques ont été transférées à Tcherkassy, et la mémoire de Makariy est célébrée le 7 septembre et le 13 mai.

Depuis le début des années 1920, la cathédrale de l'Ascension appartenait à l'UAPC, en 1925, le territoire du monastère a été occupé par une unité militaire, et au début des années 1930, le temple a été transformé en silo à grains. Pendant la guerre, la cathédrale a perdu son dôme, et des fissures sont apparues dans les murs. En 1946, les bâtiments du monastère ont été reconnus comme des monuments d'architecture d'importance nationale. Entre 1954 et 1964, la cathédrale a été restaurée, mais les fresques ont été blanchies, et elle a été utilisée comme entrepôt. Dans le clocher, une tour d'eau a été aménagée. En 1955, une zone de protection du monument a été établie, mais une partie du territoire est restée aux militaires. En 1972, le bâtiment du Collège a ouvert le Musée mémorial de Hryhoriy Skovoroda, et en 1975, un Musée-diorama a été ouvert dans la cathédrale, consacré à la traversée du Dnipro par les troupes soviétiques en 1943. Depuis 1978, la construction d'un nouveau Musée historique a été en cours, mais le projet n'a pas été achevé en raison d'un manque de financement. En 2002, le processus de transfert du territoire de l'unité militaire au Réserve historique et ethnographique nationale « Péréiaslav » a commencé. À la fin des années 1990, une communauté de l'Église orthodoxe ukrainienne du Patriarcat de Kiev a été enregistrée près de la cathédrale, dont les membres se réunissaient dans une salle spécialement aménagée, puis, dans le clocher. Pour que la renaissance de la sainteté se fasse dans le cadre de l'Église canonique, le 10 février 2011, le Saint Synode de l'Église orthodoxe ukrainienne a béni l'ouverture du monastère masculin de l'Ascension.