Die Kirche der Verkündigung der Heiligen Gottesmutter mit einer kleinen Trauerhalle wurde 1748 an dem Ort erbaut, an dem drei Jahre zuvor die hölzerne Kirche, die der Kazan-Ikone der Gottesmutter gewidmet war, verbrannt war. Der neue warme Steinkirche wurde mit Unterstützung der Moskauer Kaufleute Scheljagin errichtet. Der Mosaikboden wurde Ende des 19. Jahrhunderts mit Mitteln der Gemeindemitglieder geschaffen, von denen die meisten in der Pereslawler Manufaktur von Kuznetsov arbeiteten. An den Innenwänden und Gewölben sind Malereien erhalten geblieben, die während der Restaurierung im Jahr 1999 unter einer Schicht von Kalk entdeckt wurden. Restaurator-Künstler aus St. Petersburg haben sie freigelegt, verstärkt und wiederhergestellt. Die konische Kuppel der Verkündigungskirche, wie auch die Kuppel der Peter-Pauls-Kirche, die zur gleichen Zeit erbaut wurde, ist nach oben gestreckt und hat eine hohe schmale Trommel mit einem kleinen Haupt. An den Ecken des Vierecks befinden sich Trommeln etwas kleinerer Größe mit denselben Haupten.

Im Jahr 1900 wurde an das Hauptgebäude die Seitenkapelle der Begegnung des Herrn angebaut. Der Grund dafür war, dass der kleine Raum der Kirche nicht alle Pilger aufnehmen konnte, da die Einwohner von Pereslawl massenhaft das Nikolai-Kloster besuchten, trotz seiner Lage im Sumpf und der schlechten Erreichbarkeit aufgrund von aufgeweichten Straßen im Herbst und Schneeverwehungen im Winter. Im selben Jahr wurde mit Mitteln von Wohltätern an der Südseite der Kirche eine zweigeschossige Sakristei errichtet. 1902 wurde die neue Seitenkapelle im Namen aller Heiligen geweiht und ein zweigeschossiger Steinkelterbau, der an die Kirche angrenzt, errichtet.

Die Verkündigungskirche wurde in den 1930er Jahren geschlossen. Die Hochzeiten wurden zerstört und der Raum der ehemaligen Kirche wurde in Wohnraum umgebaut. Nach der Rückkehr des Klosters zur Russisch-Orthodoxen Kirche wurde in der Verkündigungskirche eine umfassende Renovierung durchgeführt. Mit Mitteln des Wohltäters Viktor Ivanovich Tyrishkin wurde in der Kirche ein vergoldeter vierreihiger Ikonostase installiert, der mit Schnitzereien verziert ist. Die Ikonen für den Ikonostase wurden von Absolventen der Ikonenmalerschule der Dreifaltigkeits-Sergius-Lavra gemalt. In der Kirche ruhen heute die Reliquien des pereslawlischen Heiligen, des ehrwürdigen Kornilius des Stummen, und es befindet sich das Korsun-Kreuz, das am 12. Juni 2010 feierlich aus dem Pereslawler Museum an das Kloster übergeben wurde.