Le monastère a été fondé en 1650 par l'igoumène du monastère de Mhar, Callistrate, avec le soutien du métropolite de Kiev, Silvestre Kosov, et grâce aux fonds du premier colonel de Poltava, Martin Pushkar, ainsi que d'autres représentants de l'ancienne noblesse cosaque et des citadins. En 1695, le monastère a été incendié par les Tatars de Crimée, et en 1709, les Suédois, y plaçant leurs canons, ont bombardé la ville. Selon la légende, Charles XII a été blessé à la jambe près du monastère, ce qui a limité sa mobilité le jour de la bataille de Poltava. En mémoire de la victoire, depuis 1803, il a été ordonné aux archimandrites du monastère de porter sur leurs manteaux des images du saint Sampson le Bienfaiteur et du grand martyr Georges le Victorieux. En 1857, le monastère a été associé à l'église Saint-Sampson sur le champ de bataille.

De 1775 à 1786, le monastère a servi de résidence aux évêques de Slaviansk, et de 1786 à 1797, aux évêques d'Ekaterinoslav. Ici a été enterré l'archévêque d'Ekaterinoslav, Ambroise Serebrennikov, connu pour ses sermons et sa piété, en 1792, et le saint Athanase Volkhovsky en 1801. Dans les années 1790, le vicaire de l'évêché d'Ekaterinoslav, l'évêque Ioann Potemkin, a vécu au monastère. Depuis 1884, le monastère est devenu la résidence de l'évêque vicaire de Priluki. Le monastère a été fermé en 1923, ressuscité en tant que monastère féminin en 1942, de nouveau fermé en 1960 et à nouveau ressuscité en 1991.

C'est au monastère que commence l'histoire du séminaire slaviansk, créé grâce aux efforts de l'archévêque Eugène Bulgaris. En 1778, une école pour former des chanteurs monastiques a été ouverte ici, qui a rapidement été transformée en école spirituelle et transférée en ville, où elle est devenue séminaire en 1780. Avant le transfert du séminaire à Novomyrhorod en 1798, des personnalités célèbres telles qu'Ivan Kotliarevsky, Nikolai Gnedich et Vasily Gogol-Yanovsky y ont étudié. Le séminaire était sous la direction des évêques de Slaviansk, et ses recteurs étaient l'archévêque Nikifor Theotokis et le métropolite Gabriel Banulesco-Bodoni. Depuis 1818, une école spirituelle masculine a existé au monastère, qui était située dans un bâtiment sur le flanc de la colline jusqu'en 1876, puis a été transférée en ville.

Le territoire du monastère s'étend du nord au sud sous la forme d'un losange étroit avec des sommets tronqués. Il est entouré d'une clôture en briques, construite dans la première moitié des années 1990. Au centre de la partie nord se trouve un clocher de 47 mètres de haut, construit en 1786 dans le style baroque ukrainien, rappelant la Grande Cloche de la Laure de Kiev-Petchersk. À l'ouest du clocher se trouvent les portes saintes. Au nord du clocher, en dehors du monastère, un monument a été érigé en 1991 en mémoire du nécropole monastique détruite à l'époque soviétique. Au sud du clocher se trouvent la cathédrale de la Croix-Élévation, l'église de la Sainte Trinité et l'église du saint juste Siméon le Bienfaiteur.

La cathédrale de la Croix-Élévation a été construite à la charnière des XVIIe et XVIIIe siècles dans le style baroque ukrainien, combinant des éléments de l'architecture ancienne russe, de l'architecture en bois ukrainienne et de l'architecture occidentale. Entre le clocher et la cathédrale se trouve la tombe de la moniale Antonina Zhartovska, qui a recueilli des signatures pour la renaissance du monastère. Entre la cathédrale et l'église de la Sainte Trinité se trouve une rotonde au-dessus d'une source vénérée.

L'église de la Sainte Trinité a été construite entre 1995 et 1999 à l'emplacement de l'église homonyme du XVIIIe-XIXe siècle, détruite à l'époque soviétique, qui servait de lieu d'inhumation pour les archevêques. En 2001, l'archevêque de Poltava et de Kremenchug, Théodose Dykun, a été enterré dans la crypte de l'église.

L'église du saint juste Siméon le Bienfaiteur a été construite en 1887 par le mécène poltavien Innocent Kotelnikov en mémoire de son fils unique Siméon, qui est mort à Poltava en route vers le sud pour se faire soigner de la tuberculose. Avant sa mort, le garçon a légué d'être enterré dans le monastère de la Croix-Élévation, qu'il appréciait beaucoup.

Le long de la partie ouest de la clôture du monastère, en face de la cathédrale, se trouve un bâtiment de cellules, construit en 1770 et rénové en 1863 et 1892. Plus au sud, en face de l'église de la Sainte Trinité, qui a le statut de paroisse, une maison de la communauté paroissiale de la Sainte Trinité a été construite dans les années 1990. Encore plus au sud, le long de la clôture, s'étend un bâtiment de cellules, construit en 1889 par Innocent Kotelnikov, avec une église domestique du saint Séraphin de Sarov, construite dans la première moitié des années 1990. Dans les parties sud et est de la propriété monastique se trouvent également plusieurs bâtiments utilitaires.