El monasterio fue fundado en 1650 por el igumen del monasterio de Mhar, Kalistrat, con el apoyo del metropolitano de Kiev, Silvestre Kosov, y con los fondos del primer coronel de Poltava, Martyn Pushkar, así como de otros representantes de la élite cosaca y ciudadanos. En 1695, el monasterio fue incendiado por los tártaros, y en 1709, los suecos, al colocar aquí sus cañones, bombardearon la ciudad. Según la leyenda, Carlos XII recibió una herida en la pierna cerca del monasterio, lo que limitó su movilidad el día de la batalla de Poltava. En memoria de la victoria, desde 1803 se ordenó a los archimandritas del monasterio llevar en sus mantos imágenes del venerable Sampson el Hospedador y del santo gran mártir Jorge el Victorioso. En 1857, se anexó al monasterio la iglesia de San Sampson en el campo de batalla.

Desde 1775 hasta 1786, el monasterio sirvió como residencia de los obispos de Slaviansk, y desde 1786 hasta 1797, de los de Ekaterinoslav. Aquí fue enterrado el famoso arzobispo de Ekaterinoslav, Amvrosio Serebrenikov, conocido por sus sermones y piedad, en 1792, y el santo Athanasio Volkovsky en 1801. En la década de 1790, vivió en el monasterio el obispo Iov Potemkin, vicario de la diócesis de Ekaterinoslav. Desde 1884, el monasterio se convirtió en la residencia del obispo vicario de Priluki. La comunidad fue cerrada en 1923, renacida como femenina en 1942, cerrada nuevamente en 1960 y resurgida en 1991.

En el monasterio comenzó la historia del seminario de Slaviansk, creado por los esfuerzos del arzobispo Eugenio Bulgaris. En 1778 se abrió aquí una escuela para preparar cantores del monasterio, que pronto se transformó en una escuela teológica y se trasladó a la ciudad, donde en 1780 se convirtió en seminario. Hasta el traslado del seminario a Novomirgorod en 1798, estudiaron aquí personalidades notables como Iván Kotliarevsky, Nikolái Gnedich y Vasili Gogol-Yanovsky. El seminario estuvo bajo la dirección de los obispos de Slaviansk, y sus rectores fueron el arzobispo Nikifor Teotokis y el metropolitano Gabriel Banulesco-Bodoni. Desde 1818, existió en el monasterio una escuela teológica masculina, que hasta 1876 se ubicó en un edificio en la ladera de la colina, y luego fue trasladada a la ciudad.

El territorio del monasterio se extiende de norte a sur en forma de un rombo estrecho con vértices truncados. Está rodeado por un muro de ladrillo, construido en la primera mitad de la década de 1990. En el centro de la parte norte se encuentra el campanario de 47 metros de 1786 en estilo barroco ucraniano, que recuerda a la Gran Campana del Monasterio de las Cuevas de Kiev. Al oeste del campanario se encuentran las puertas sagradas. Al norte del campanario, fuera del monasterio, se erigió en 1991 un monumento en honor al necrópolis del monasterio destruido en la época soviética. Al sur del campanario se encuentran la catedral de la Exaltación de la Cruz, la iglesia de la Santísima Trinidad y la iglesia del justo Simeón el Hospedador.

La catedral de la Exaltación de la Cruz fue construida a finales del siglo XVII y principios del XVIII en estilo barroco ucraniano, combinando elementos de la arquitectura antigua rusa, la madera ucraniana y la arquitectura occidental. Entre el campanario y la catedral se encuentra la tumba de la monja Antonina Zhartovska, quien recogió firmas para la resurrección del monasterio. Entre la catedral y la iglesia de la Santísima Trinidad hay una rotonda sobre una fuente venerada.

La iglesia de la Santísima Trinidad fue construida entre 1995 y 1999 en el lugar de la iglesia homónima del siglo XVIII-XIX, destruida en la época soviética, que servía como lugar de entierro de los arzobispos. En 2001, el metropolitano de Poltava y Kremenchug, Feodosiy Dykun, fue enterrado en la cripta de la iglesia.

La iglesia del justo Simeón el Hospedador fue erigida en 1887 por el mecenas poltaviano Inokentiy Kotelnikov en memoria de su único hijo Simeón, quien murió en Poltava mientras viajaba al sur para recibir tratamiento de tuberculosis. Antes de morir, el niño legó que lo enterraran en la comunidad de la Exaltación de la Cruz, que le había gustado mucho.

A lo largo de la parte occidental del muro del monasterio, frente a la catedral, se encuentra el edificio de las celdas, construido en 1770 y renovado en 1863 y 1892. Al sur, frente a la iglesia de la Santísima Trinidad, que tiene estatus de parroquia, se construyó en la década de 1990 la casa de la comunidad parroquial de la Santísima Trinidad. Más al sur, a lo largo del muro, se extiende el edificio de las celdas, erigido en 1889 por Inokentiy Kotelnikov, con la iglesia doméstica del venerable Serafim de Sarov, construida en la primera mitad de la década de 1990. En las partes sur y este de la finca del monasterio también hay varios edificios de servicios.