В 1731 году началось строительство каменного соборного храма Успения Божией Матери с приделами Усекновения главы Иоанна Предтечи и Святителя Николая, однако приделы тогда не были завершены.

В 1861 году трапезная часть храма была разобрана и перестроена, расширившись на обе стороны для размещения двух приделов. Справа был создан придел в честь Покрова Пресвятой Богородицы, а слева, перенесен иконостас из старого Никольского храма и устроен придел в честь Святителя Николая.

В 1994 году, после возвращения монастыря Церкви, первым был восстановлен Успенский храм, который остался единственной связью с прошлым, так как остальное было разрушено. В связи с постройкой корпуса с Никольским храмом, 14 октября 2001 года правый придел был освящен в честь Покрова Божией Матери, а 13 сентября 2003 года освящены центральный Успенский придел и левый придел Иоанна Крестителя.

Храм Успения Богородицы, расположенный в центре монастыря, считается главным. Внутри установлены три ковчега с частицами мощей. В Успенском приделе хранятся главные святыни: икона Святителя Николая с частицей мощей, башмачок Святителя Спиридона Тримифунтского, икона Почаевской Божией Матери с частицами мощей Иова и Амфилохия Почаевских, частицы мощей князя Владимира и княгини Ольги, а также ковчег с частицами мощей Глинских старцев.

Другой ковчег находится в нише правого, Покровского, придела, где хранятся частицы мощей таких святых, как Луки Крымского, Иннокентия Московского, Филарета Московского, Амвросия Медиоланского и других. Здесь же находятся мощи благоверных князей Петра и Февронии Муромских, а также других святых и мучеников.

Третий ковчег расположен в нише левого придела Усекновения главы Иоанна Предтечи и содержит частицы мощей преподобных Герасима Иорданского, Моисея Угрина Печерского, Ионы Киевского и многих других святых.